La Electroforesis: Una técnica de laboratorio esencial
Una técnica versátil y eficiente para el diagnóstico y la investigación
La electroforesis es una técnica de laboratorio que se utiliza para separar moléculas de ADN, ARN o proteínas en función de su tamaño y carga eléctrica. Esta técnica tiene una amplia variedad de aplicaciones, desde el diagnóstico de enfermedades como la anemia falciforme hasta la identificación de microorganismos en proyectos de investigación.
Beneficios y aplicaciones
La electroforesis es una herramienta invaluable en el campo de la investigación científica y el diagnóstico médico. Algunas de sus aplicaciones más comunes incluyen:
- Identificar virus, hongos, bacterias y parásitos.
- Pruebas de paternidad.
- Verificar la expresión de proteínas.
- Identificar mutaciones en el diagnóstico de leucemias.
- Analizar los tipos de hemoglobina circulantes en el diagnóstico de anemia falciforme.
- Evaluar la cantidad de proteínas presentes en la sangre.
- Diagnosticar afecciones que afectan a las células plasmáticas, como macroglobulinemia de Waldenström, gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI) y amiloidosis primaria.
La electroforesis de proteínas también puede ser utilizada para ayudar en el diagnóstico de problemas tiroideos, diabetes, enfermedades hepáticas y algunas enfermedades autoinmunes.
Es importante tener en cuenta que, dependiendo de la finalidad de la electroforesis, pueden ser necesarias otras pruebas y exámenes complementarios para llegar a un diagnóstico preciso.
El procedimiento detallado
El procedimiento de electroforesis consta de varias etapas esenciales:
- Preparación del gel y soluciones: Se debe preparar un gel de agarosa o poliacrilamida según el objetivo de la técnica. Además, se necesita una solución tampón, una cuba de electroforesis, un marcador de peso molecular y una sustancia que permita la visualización de las muestras bajo luz UV o LED.
- Carga de las muestras: Se coloca cada muestra en una cavidad del gel, mezclándola con una pequeña cantidad de marcador de peso molecular.
- Controles positivos y negativos: Se colocan en dos cavidades diferentes un control positivo, que es una sustancia conocida, y un control negativo para garantizar la validez de la reacción. Ambos controles también deben tener un marcador de peso molecular.
- Ejecución de la electroforesis: El gel se coloca en la cuba de electroforesis con la solución tampón específica, y se enciende el dispositivo para generar una corriente eléctrica que separa las partículas según su carga y tamaño. El tiempo de ejecución electroforética varía según el objetivo del procedimiento y puede durar hasta 1 hora.
- Visualización de los resultados: Después de la electroforesis, se utiliza un transiluminador para visualizar el patrón de bandas en el gel. Cuanto más grande es la molécula, menor es su migración, mientras que las moléculas más ligeras tienen un mayor potencial migratorio.
Es crucial validar la reacción verificando las bandas del control positivo y asegurándose de que no haya nada visible en el control negativo. Si hay alguna contaminación, se debe repetir todo el procedimiento.
Tipos de electroforesis
La electroforesis puede ser utilizada para identificar microorganismos en proyectos de investigación, así como para diagnosticar enfermedades hematológicas y enfermedades que se asocian con el aumento de la cantidad de proteínas en el cuerpo. Los principales tipos de electroforesis son:
1. Electroforesis de hemoglobina
La electroforesis de hemoglobina se realiza para identificar los diferentes tipos de hemoglobina presentes en la sangre y detectar enfermedades relacionadas con su síntesis. Este tipo de electroforesis se realiza en un pH específico, idealmente entre 8.0 y 9.0, y permite identificar patrones de bandas anormales en comparación con el patrón normal.
Aplicaciones: La electroforesis de hemoglobina se utiliza para investigar y diagnosticar enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina, como la anemia falciforme y la enfermedad de la hemoglobina C, y también puede ayudar en la diferenciación de las talasemias.
2. Electroforesis de proteínas
La electroforesis de proteínas se realiza para evaluar la cantidad de proteínas circulantes en la sangre y es útil en el diagnóstico de varias condiciones médicas. Después de la electroforesis, se visualiza un patrón de bandas y se genera un gráfico que indica la cantidad de cada fracción de proteínas, lo cual es fundamental para el diagnóstico médico.
Aplicaciones: La electroforesis de proteínas permite diagnosticar condiciones como el mieloma múltiple, deshidratación, cirrosis, inflamaciones, enfermedades hepáticas, pancreatitis, lupus e hipertensión, según el patrón de bandas y el gráfico presentado en el informe del examen.
